{"id":139,"date":"2018-04-01T12:44:15","date_gmt":"2018-04-01T03:44:15","guid":{"rendered":"https:\/\/sar.pharm.or.jp\/?p=139"},"modified":"2018-12-10T12:41:44","modified_gmt":"2018-12-10T03:41:44","slug":"sarnews-no-34","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/sar.pharm.or.jp\/en\/sarnews-no-34\/","title":{"rendered":"SARNews No.34"},"content":{"rendered":"<p><a href=\"https:\/\/sar.pharm.or.jp\/wp-content\/uploads\/2018\/09\/SARNews_34.pdf\">SARNews_34<\/a><\/p>\n<p>\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u90e8\u4f1a\u30fb\u30cb\u30e5\u30fc\u30b9\u30ec\u30bf\u30fc<1April,2018>SARNewsNo.34\u300c\u76ee\u6b21\u300d\/\/\/\/\/Perspective\/Retrospective\/\/\/\/\/\u85e4\u7530\u7a14\u592b\u5148\u751f\u8ffd\u60bc\u30bb\u30c3\u30b7\u30e7\u30f3\u300cHansch-Fujita\u6cd5\u306e\u8a95\u751f\u3068\u6b74\u53f2\u300d\u304b\u3089\u8d64\u677e\u7f8e\u7d00\uff65\uff65\uff65\uff11\/\/\/\/\/CuttingEdge\/\/\/\/\/\u3042\u308b\u4f01\u696d\u7814\u7a76\u8005\u306e\u7c73\u56fd\u7814\u7a76\u30b5\u30d0\u30a4\u30d0\u30eb\u8a18\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u306e\u81ea\u52d5\u63a2\u7d22\uff5e\u81ea\u52d5\u8a2d\u8a08\u3068\u81ea\u52d5\u5408\u6210\u304c\u878d\u5408\u3059\u308b\u30ed\u30dc\u30c3\u30c8\u5275\u85ac\u306e\u5e55\u958b\u3051\uff5e\u5927\u4fdd\u4e09\u7a42\uff65\uff65\uff659\u77f3\u539f\u53f8\uff65\uff65\uff6516\/\/\/\/\/SARPresentationAward\/\/\/\/\/2017\u5e74\u5ea6\u9078\u8003\u7d50\u679c\u306b\u3064\u3044\u3066\uff65\uff65\uff6525\u53d7\u8cde\u30b3\u30e1\u30f3\u30c8\uff65\uff65\uff6526\u6388\u8cde\u8b1b\u6f14\u8981\u65e8\uff65\uff65\uff6528\/\/\/\/\/Activities\/\/\/\/\/\uff1c\u5831\u544a\uff1e\u7b2c45\u56de\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\u958b\u50ac\u5831\u544a\uff65\uff65\uff6536\uff1c\u4f1a\u544a\uff1e\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u30d5\u30a9\u30fc\u30e9\u30e02018\u300c\u5275\u85ac\u306b\u304a\u3051\u308b\u30d3\u30c3\u30b0\u30c7\u30fc\u30bf\u306e\u6d3b\u7528\u3068AI\u6226\u7565\u300d\uff65\uff65\uff6538\u7b2c11\u56de\u85ac\u7269\u306e\u5206\u5b50\u8a2d\u8a08\u3068\u958b\u767a\u306b\u95a2\u3059\u308b\u65e5\u4e2d\u5408\u540c\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\uff65\uff65\uff6540\u7b2c46\u56de\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\uff65\uff65\uff6541\/\/\/\/\/Perspective\/Retrospective\/\/\/\/\/\u85e4\u7530\u7a14\u592b\u5148\u751f\u8ffd\u60bc\u30bb\u30c3\u30b7\u30e7\u30f3\u300cHansch-Fujita\u6cd5\u306e\u8a95\u751f\u3068\u6b74\u53f2\u300d\u304b\u3089\u4eac\u90fd\u5927\u5b66\u5927\u5b66\u9662\u8fb2\u5b66\u7814\u7a76\u79d1\u8d64\u677e\u7f8e\u7d001.\u306f\u3058\u3081\u306b2017\u5e7411\u6708\u306b\u8328\u57ce\u770c\u571f\u6d66\u5e02\u3067\u958b\u50ac\u3055\u308c\u305f\u7b2c45\u56de\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\u306b\u304a\u3044\u3066\u3001\u8a18\u5ff5\u8b1b\u6f14\u3092\u3055\u308c\u308b\u4e88\u5b9a\u3067\u3042\u3063\u305f\u85e4\u7530\u7a14\u592b\u5148\u751f\u304c8\u6708\u306b\u3054\u901d\u53bb\u3055\u308c\u305f\u3002\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u90e8\u4f1a\u9577\u3001\u4e2d\u5ddd\u597d\u79cb\u5148\u751f\u304c\u85e4\u7530\u5148\u751f\u306e\u8ffd\u60bc\u6587\uff08SARNewsNo.33\uff09\u3092\u57f7\u7b46\u3055\u308c\u3066\u3044\u308b\u304c\u3001\u85e4\u7530\u5148\u751f\u306e\u3054\u51a5\u798f\u3092\u304a\u7948\u308a\u3057\u305f\u3044\u3002\u6025\u907d\u3001\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\u3067\u306f\u3001\u4e2d\u5ddd\u90e8\u4f1a\u9577\u304a\u3088\u3073\u7b46\u8005\u304c\u30aa\u30fc\u30ac\u30ca\u30a4\u30b6\u30fc\u3068\u306a\u3063\u3066\u3001\u85e4\u7530\u5148\u751f\u306e\u8ffd\u60bc\u30bb\u30c3\u30b7\u30e7\u30f3\u3092\u884c\u3046\u3053\u3068\u3068\u306a\u3063\u305f\u3002\u30bb\u30c3\u30b7\u30e7\u30f3\u306e\u5185\u5bb9\u306f\u4ee5\u4e0b\u306e\u901a\u308a\u3067\u3042\u308b\u30021.\u85e4\u7530\u5148\u751f\u3068\u4e8c\u56fd\u9593\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\uff1a\u65b0\u6f5f\u85ac\u79d1\u5927\u5b66\u5b66\u9577\u5bfa\u7530\u5f182.\u85e4\u7530\u5148\u751f\u8a18\u5ff5\u8b1b\u6f14\u4e88\u5b9a\u5185\u5bb9\u6982\u8981\uff1a\u4eac\u90fd\u5927\u5b66\u5927\u5b66\u9662\u8fb2\u5b66\u7814\u7a76\u79d1\u8d64\u677e\u7f8e\u7d003.Hansch-Fujita\u6cd5\u304a\u3088\u3073\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u90e8\u4f1a\u306e\u6b74\u53f2\uff1a\u4eac\u90fd\u5927\u5b66\u5927\u5b66\u9662\u8fb2\u5b66\u7814\u7a76\u79d1\u3001\u65e5\u672c\u85ac\u5b66\u4f1a\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u90e8\u4f1a\u9577\u4e2d\u5ddd\u597d\u79cb\u4ee5\u4e0b\u3001\u305d\u308c\u305e\u308c\u306b\u3064\u3044\u3066\u8a73\u7d30\u3092\u8ff0\u3079\u308b\u30022.\u85e4\u7530\u5148\u751f\u3068\u4e8c\u56fd\u9593\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\u6700\u521d\u306b\u5bfa\u7530\u5148\u751f\u3068\u85e4\u7530\u5148\u751f\u306e\u51fa\u4f1a\u3044\u3001\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u90e8\u4f1a\u306e\u524d\u8eab\u3067\u3042\u308b\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u61c7\u8a71\u4f1a\u306e\u7acb\u3061\u4e0a\u3052\u30011975\u5e74\u306e\u4eac\u90fd\u306b\u304a\u3051\u308b\u7b2c1\u56de\u61c7\u8a71\u4f1a\u958b\u50ac\u306b\u3064\u3044\u3066\u306e\u304a\u8a71\u304c\u3042\u3063\u305f\u3002\u3061\u3087\u3046\u3069\u3001\u30a8\u30ea\u30b6\u30d9\u30b9\u5973\u738b\u304c\u6765\u4eac\u3055\u308c\u305f\u5e74\u3060\u305d\u3046\u3067\u3042\u308b\u3002\u305d\u306e\u5f8c\u3001\u61c7\u8a71\u4f1a\u306f\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u7814\u7a76\u4f1a\u3068\u540d\u79f0\u3092\u6539\u3081\u30012002\u5e74\u306b\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u9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8c\u305f[2]\u3002\u9664\u8349\u6d3b\u6027\u3092\u793a\u3059\u521d\u671f\u306e\u5408\u6210\u30aa\u30fc\u30ad\u30b7\u30f3\u306f2,4-D\u306a\u3069\u306e\u30d9\u30f3\u30bc\u30f3\u8a98\u5c0e\u4f53\u3067\u3001IAA\u3068\u540c\u69d8\u306b\u30d9\u30f3\u30bc\u30f3\u74b0\u3068\u30ab\u30eb\u30dc\u30ad\u30b7\u30eb\u57fa\u306f\u5c11\u306a\u304f\u3068\u30821\u500b\u306e\u70ad\u7d20\u539f\u5b50\u3067\u9694\u3066\u3089\u308c\u3066\u3044\u305f\u3002\u305d\u306e\u5f8c\u3001\u5b89\u606f\u9999\u9178\u3084\u30d4\u30b3\u30ea\u30f3\u9178\u306e\u3088\u3046\u306a\u82b3\u9999\u74b0\u306b\u76f4\u63a5\u30ab\u30eb\u30dc\u30ad\u30b7\u57fa\u304c\u7d50\u5408\u3057\u305f\u9664\u8349\u5264\u304c\u958b\u767a\u3055\u308c\u305f\u30021963\u5e74\u306b\u4e0a\u5e02\u3055\u308c\u305f\u30d4\u30b3\u30ea\u30f3\u9178\u7cfb\u9664\u8349\u5264Picloram\u3001\u304a\u3088\u3073\u88fd\u5264\u5316\u306e\u5bb9\u6613\u3055\u304b\u30892012\u5e74\u306b\u30e1\u30c1\u30eb\u30a8\u30b9\u30c6\u30eb\u4f53\u304c\u4e0a\u5e02\u3055\u308c\u305f\u304c\u3001\u305d\u306e\u30ea\u30fc\u30c9\u5316\u5408\u7269\u3067\u3042\u308b\u30d4\u30b3\u30ea\u30f3\u9178\u4f53\u306eHalauxifen\u306e\u69cb\u9020\u3092\u56f32\u306b\u793a\u3059[3]\u3002(2)Aspirin\uff08\u30a2\u30bb\u30c1\u30eb\u30b5\u30ea\u30c1\u30eb\u9178\uff09\u306b\u7aef\u3092\u767a\u3057\u305f\u30b5\u30ea\u30c1\u30eb\u9178\u7cfb\u6297\u708e\u75c7\u5264\u306f\u3001\u305d\u306e\u5f8c\u3001\u30ab\u30eb\u30dc\u30ad\u30b7\u30eb\u57fa\u306e\u30e1\u30bf\u4f4d\uff08\u30a2\u30bb\u30c8\u30ad\u30b7\u57fa\u306e\u30d1\u30e9\u4f4d\uff09\u306b\u30d5\u30eb\u30aa\u30ed\u30d5\u30a7\u30cb\u30eb\u3001\u30b8\u30d5\u30eb\u30aa\u30ed\u30d5\u30a7\u30cb\u30eb\u57fa\u3092\u6301\u3064\u69cb\u9020\u3078\u3068\u5909\u308f\u3063\u3066\u3044\u3063\u305f\u3002\u3059\u306a\u308f\u3061\u3001Flufenisal\u3001diflunisal\u306a\u3069\u3067\u3042\u308b\u3002Diflunisal\u306fOH\u57fa\u304c\u30a2\u30bb\u30c1\u30eb\u5316\u3055\u308c\u3066\u3044\u306a\u3044\u69cb\u9020\u3092\u6301\u3063\u3066\u3044\u308b\u3002\u30b5\u30ea\u30c1\u30eb\u9178\u7cfb\u6297\u708e\u75c7\u5264\u3068\u985e\u4f3c\u306e\u4f5c\u7528\u3092\u793a\u3059indomethacin\u304c\u30a4\u30f3\u30c9\u30fc\u30eb\u74b0\u3068\u30ab\u30eb\u30dc\u30ad\u30b7\u30eb\u57fa\u306e\u9593\u306b1\u500b\u306e\u70ad\u7d20\u539f\u5b50\u3092\u3082\u3064IAA\u306e\u69cb\u9020\u3092\u542b\u3080\u3053\u3068\u306f\u3001\u30aa\u30fc\u30ad\u30b7\u30f3\u3068\u306e\u95a2\u9023\u304c\u793a\u5506\u3055\u308c\u3066\u8208\u5473\u6df1\u3044\u3002\u3053\u308c\u3089\u306e\u85ac\u5264\u306f\u30b7\u30af\u30ed\u30aa\u30ad\u30b7\u30b2\u30ca\u30fc\u30bc(COX)\u3092\u963b\u5bb3\u3057\u3001\u75db\u307f\u306e\u5143\u3068\u306a\u308b\u30d7\u30ed\u30b9\u30bf\u30b0\u30e9\u30f3\u30b8\u30f3\u306e\u751f\u6210\u3092\u6291\u3048\u308b\u3002\u3053\u308c\u3089\u306e\u6297\u708e\u75c7\u5264\u306e\u69cb\u9020\u3092\u56f32\u306b\u793a\u3059[4]\u3002(3)\u764c\u30de\u30fc\u30ab\u30fc\u3068\u3057\u3066\u6ce8\u76ee\u3055\u308c\u308b\u30a2\u30eb\u30c9-\u30b1\u30c8\u9084\u5143\u9175\u7d20(AKR)\u306e\u4e00\u7a2e\u3001AKR1C1\u306e\u963b\u5bb3\u5264\u3068\u3057\u3066\u3001\u9175\u7d20\u306e\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u3092\u7528\u3044\u305f\u30d0\u30fc\u30c1\u30e3\u30eb\u30b9\u30af\u30ea\u30fc\u30cb\u30f3\u30b0\u304b\u3089\u30b5\u30ea\u30c1\u30eb\u9178\u8a98\u5c0e\u4f533,5-\u30b8\u30e8\u30fc\u30c9\u30b5\u30ea\u30c1\u30eb\u9178\u304c\u898b\u51fa\u3055\u308c\u3001\u3053\u306e\u5316\u5408\u7269\u306esimilaritysearch\u304b\u3089\u898b\u51fa\u3055\u308c\u305f\u3088\u308a\u9ad8\u6d3b\u6027\u306e3,5-\u30b8\u30af\u30ed\u30ed\u30b5\u30ea\u30c1\u30eb\u9178\u3068\u9175\u7d20\u3068\u306e\u5171\u7d50\u6676\u304c\u5831\u544a\u3055\u308c\u305f[5,6]\u3002\u305d\u306e\u5f8c\u3001\u9175\u7d20\u8907\u5408\u4f53\u306e\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u304a\u3088\u3073Goodford\u3089\u306b\u3088\u308a\u958b\u767a\u3055\u308c\u305fGRID\u89e3\u6790[7]\u306b\u3088\u308a\u3001\u3055\u3089\u306b\u9ad8\u6d3b\u6027\u306e\u963b\u5bb3\u5264\u3068\u3057\u30663-\u30d6\u30ed\u30e25-\u30d5\u30a7\u30cb\u30eb\u30b5\u30ea\u30c1\u30eb\u9178\u304c\u30c7\u30b6\u30a4\u30f3\u3055\u308c\u305f\uff08\u56f32\uff09[8]\u3002\u3053\u308c\u3089\u306e\u963b\u5bb3\u5264\u306f\u5236\u30ac\u30f3\u5264\u3068\u3057\u3066\u3082\u671f\u5f85\u3055\u308c\u3066\u3044\u308b\u3002\u56f32\u3092\u898b\u308b\u3068\u308f\u304b\u308b\u3088\u3046\u306b\u3001\u3053\u308c\u30893\u7a2e\u985e\u306eSAR\u4f8b\u306f\u985e\u4f3c\u306e\u30d1\u30bf\u30fc\u30f3\u3092\u793a\u3057\u3066\u3044\u308b\u3002\u3059\u306a\u308f\u3061\u3001\u5143\u5316\u5408\u7269\u306f\u30ab\u30eb\u30dc\u30ad\u30b7\u30eb\u57fa\u3092\u6301\u3064\u82b3\u9999\u65cf\u306e\u30d4\u30b3\u30ea\u30f3\u9178\u3042\u308b\u3044\u306f\u30b5\u30ea\u30c1\u30eb\u9178\u69cb\u9020\u3067\u3001\u30ab\u30eb\u30dc\u30ad\u30b7\u30eb\u57fa\u306e\u30e1\u30bf\u4f4d\u306b\u5f53\u305f\u308b\u4f4d\u7f6e\u306b\uff08\u7f6e\u63db\uff09\u30d5\u30a7\u30cb\u30eb\u57fa\u304c\u5c0e\u5165\u3055\u308c\u3066\u6d3b\u6027\u5f37\u5ea6\u304c\u4e0a\u6607\u3057\u3066\u3044\u308b\u3002\u300cSAR-ome\u300d\u3068\u306f\u3001\u3053\u306e3\u7a2e\u9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\u6790\u5f0f\u3092\u5c0e\u304f\u3002\u7279\u306b1962\u5e74Nature\u8a8c[13]\u30011964\u5e74\u306b\u30a2\u30e1\u30ea\u30ab\u5316\u5b66\u4f1a\u8a8c(JACS)\u306b\u767a\u8868\u3055\u308c\u305f2\u8ad6\u6587[14,15]\u306f\u6570\u591a\u304f\u5f15\u7528\u3055\u308c\u3001lnstituteofScientificInformation(Philadelphia)\u306b\u3088\u3063\u3066\u201cCitationClassics&#8221;\u306b\u9078\u3070\u308c\u3066\u3044\u308b\u3002\u307e\u305f\u30011964\u5e74\u306e2\u8ad6\u6587\u306f\u30012003\u5e74\u306bJACS\u306e125\u5dfb\u3092\u8a18\u5ff5\u3057\u3066\u30ce\u30df\u30cd\u30fc\u30c8\u3055\u308c\u305f\u3001JACS\u63b2\u8f09\u8ad6\u6587\u3067\u6700\u3082\u591a\u304f\u5f15\u7528\u3055\u308c\u305f\u8ad6\u6587\u306e39\u4f4d\u306844\u4f4d\u306b\u30e9\u30f3\u30af\u3055\u308c\u3066\u3044\u308b\u30022012\u5e748\u6708\u306b\u3001\u6b21\u306b\u8ff0\u3079\u308b\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u306e\u4e3b\u50ac\u3067\u3001Hansch-Fujita\u6cd550\u5468\u5e74\u8a18\u5ff5\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\u304c\u4eac\u90fd\u5927\u5b66\u3067\u958b\u50ac\u3055\u308c\u305f\u3002Hansch\u5148\u751f\u306f\u305d\u306e\u524d\u5e74\u306b\u3054\u901d\u53bb\u3055\u308c\u305f\u305f\u3081\u3001\u30b7\u30f3\u30dd\u30b8\u30a6\u30e0\u3078\u306e\u3054\u53c2\u52a0\u306f\u53f6\u308f\u306a\u304b\u3063\u305f\u304c\u3001\u73fe\u5728\u3001\u30dd\u30e2\u30ca\u5927\u5b66\u3067Hansch\u5148\u751f\u306e\u7814\u7a76\u3092\u7d99\u627f\u3055\u308c\u3066\u3044\u308bCynthiaSelassie\u6559\u6388\u3092\u62db\u5f85\u3057\u3001\u8b1b\u6f14\u3057\u3066\u3044\u305f\u3060\u3044\u305f\u3002\u307e\u305f\u3001\u540c\u5e74\u306b\u5143\u7c73\u56fd\u30a2\u30dc\u30c3\u30c8\u793e\u306eYvonneConnollyMartin\u535a\u58eb\u304c\u3001Hansch-Fujita\u6cd550\u5468\u5e74\u3092\u8a18\u5ff5\u3057\u3066Comput.Mol.Sci.\u8a8c\u306b\u300cHansch-Fujita\u6cd5\u306e\u8a95\u751f\u3001\u6b74\u53f2\u3001\u73fe\u5728\u300d\u306b\u3064\u3044\u3066\u8a18\u4e8b\u3092\u66f8\u3044\u3066\u304a\u3089\u308c\u308b[16]\u30021993\u5e74\u3001\u85e4\u7530\u5148\u751f\u304cHansch\u5148\u751f\u3092\u8a2a\u554f\u3057\u305f\u969b\u306b\u3001Hansch\u5148\u751f\u304c\u7a7a\u6e2f\u307e\u3067\u8fce\u3048\u306b\u6765\u3089\u308c\u305f\u6642\u306e\u5199\u771f\u3092\u56f33\u306b\u793a\u3059\u3002\u5f8c\u308d\u306bHansch\u5148\u751f\u306e\u8eca\u304c\u5199\u3063\u3066\u3044\u308b\u304c\u3001\u30ca\u30f3\u30d0\u30fc\u30d7\u30ec\u30fc\u30c8\u306e\u6587\u5b57\u304c\u300cQSAR\u300d\u3067\u3042\u308b\u3053\u3068\u306b\u6ce8\u76ee\u3057\u3066\u3044\u305f\u3060\u304d\u305f\u3044\u30024.3\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u85e4\u7530\u5148\u751f\u306e\u9580\u4e0b\u751f\u3092\u4e2d\u5fc3\u3068\u3057\u305f\u52c9\u5f37\u4f1a\u3067\u3042\u308b\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u304c\u8fd1\u5e74\u306f\u5e74\u306b\uff11\u56de\u30011\u6cca2\u65e5\u3067\u958b\u50ac\u3055\u308c\u3066\u304d\u305f\u30022017\u5e749\u6708\u306b\u306f\u85e4\u7530\u5148\u751f\u306e\u85ac\u5b66\u4f1a\u529f\u52b4\u8cde\u53d7\u8cde\u795d\u8cc0\u4f1a\u3068\u4f75\u305b\u3066\u3001\u7b2c34\u56de\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u304c\u958b\u50ac\u4e88\u5b9a\u3067\u3042\u3063\u305f\u304c\u3001\u958b\u50ac\u306f\u53f6\u308f\u306a\u304b\u3063\u305f\u3002\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u306e\u5e79\u4e8b\u9577\u3001\u5ca1\u5cf6\u4f38\u4e4b\u535a\u58eb\u304b\u3089\u3001\u672c\u30bb\u30c3\u30b7\u30e7\u30f3\u3067\u304a\u8a00\u8449\u3092\u3044\u305f\u3060\u304f\u306f\u305a\u3060\u3063\u305f\u304c\u3001\u5ca1\u5cf6\u535a\u58eb\u304c\u6240\u7528\u306e\u305f\u3081\u3001\u30bb\u30c3\u30b7\u30e7\u30f3\u306b\u51fa\u5e2d\u3067\u304d\u306a\u304b\u3063\u305f\u306e\u3067\u3001\u4e2d\u5ddd\u5148\u751f\u304c\u5ca1\u5cf6\u535a\u58eb\u306e\u8a00\u8449\u3092\u4ee3\u8aad\u3057\u305f\u3002\u4ee5\u4e0b\u3001\u5ca1\u5cf6\u535a\u58eb\u306e\u8a00\u8449\u3092\u305d\u306e\u307e\u307e\u63b2\u8f09\u3059\u308b\u3002&#8212;&#8211;\u300c1981\u5e74\u3001\u85e4\u7530\u7a14\u592b\u5148\u751f\u304c\u4eac\u90fd\u5927\u5b66\u3054\u5728\u8077\u4e2d\u306b\u9580\u4e0b\u751f\u306e\u52c9\u5f37\u4f1a\u3068\u3057\u3066\u59cb\u3081\u3089\u308c\u305f\u30c9\u30e9\u30c3\u30b0\u30c7\u30b6\u30a4\u30f3\u7814\u7a76\u4f1a\u958b\u50ac\u304b\u3089\u65e9\u300135\u5e74\u304c\u7d4c\u904e\u3044\u305f\u3057\u307e\u3057\u305f\u3002\u7b2c12\u56de[1995\u5e74]\u3088\u308a\u300c\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u300d\u3068\u540d\u524d\u3092\u6539\u3081\u3001\u305d\u306e\u5f8c\u3082\u30d0\u30a4\u30aa\u30b5\u30a4\u30a8\u30f3\u30b9\u7814\u7a76\u306b\u643a\u308f\u308b\u7814\u7a76\u8005\u306e\u52c9\u5f37\u3068\u60c5\u5831\u4ea4\u63db\u306e\u5834\u3068\u3057\u3066\u8f2a\u3092\u5e83\u3052\u3066\u53c2\u308a\u307e\u3057\u305f\u3002\u300d\u3053\u308c\u306f\u30012017\u5e749\u6708\u958b\u50ac\u4e88\u5b9a\u3060\u3063\u305f\u7b2c34\u56de\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u3054\u6848\u5185\u72b6\u306e\u5192\u982d\u6587\u3067\u3057\u305f\u304c\u3001\u3053\u308c\u306f\u958b\u50ac\u3055\u308c\u308b\u3053\u3068\u306f\u3042\u308a\u307e\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b2c\u4e00\u306e\u610f\u5473\u3082\u5c11\u3057\u542b\u307e\u308c\u308b\u304c\u3001\u3044\u305a\u308c\u3082\u7b2c\u4e8c\u306e\u610f\u5473\u3092\u53d6\u308b\u306e\u304c\u9069\u5207\u3067\u3042\u308b\u3068\u601d\u308f\u308c\u308b\u3002\u300c\u69cb\u52b9\u300d\u306f\u8a00\u3046\u307e\u3067\u3082\u306a\u304f\u3001\u300c\u69cb\u9020\u300d\u3068\u300c\u52b9\u679c\u300d\u3001\u3059\u306a\u308f\u3061\u3001\u300c\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u300d\u306e\u3053\u3068\u3067\u3042\u308b\u3002\u3057\u305f\u304c\u3063\u3066\u3001\u300c\u9808\u7aae\u69cb\u52b9\u300d\u3068\u306f\u3001\u300c\uff08\u662f\u975e\u3068\u3082\uff09\u307f\u3093\u306a\u3001\uff08\u884c\u304d\u8a70\u307e\u308a\u3001\u56f0\u308b\u3053\u3068\u3082\u3042\u308b\u304b\u3082\u3057\u308c\u306a\u3044\u304c\uff09\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u3092\u7a81\u304d\u8a70\u3081\u3001\u3057\u3063\u304b\u308a\u3084\u308a\u307e\u3057\u3087\u3046\u300d\u3068\u3044\u3046\u610f\u5473\u3067\u3042\u308b\u3002\u308f\u308c\u308f\u308c\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u7814\u7a76\u306b\u95a2\u308f\u308b\u8005\u306f\u3001\u85e4\u7530\u5148\u751f\u304c\u6b8b\u3055\u308c\u305f\u3053\u306e\u719f\u8a9e\u3092\u3057\u3063\u304b\u308a\u3068\u80f8\u306b\u523b\u307f\u3001\u5c06\u6765\u306e\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u7814\u7a76\u306e\u767a\u5c55\u306b\u5bc4\u4e0e\u3057\u3066\u3044\u304b\u306a\u3051\u308c\u3070\u306a\u3089\u306a\u3044\u3068\u601d\u3063\u3066\u3044\u308b\u3002\u8b1d\u8f9e\u5bfa\u7530\u5148\u751f\u3001\u4e2d\u5ddd\u5148\u751f\u3088\u308a\u3001\u30bb\u30c3\u30b7\u30e7\u30f3\u3067\u4f7f\u7528\u3055\u308c\u305f\u30b9\u30e9\u30a4\u30c9\u304a\u3088\u3073\u60c5\u5831\u3092\u3044\u305f\u3060\u304d\u3001\u53c2\u8003\u304a\u3088\u3073\u5199\u771f\u306e\u8ee2\u8f09\u3092\u3055\u305b\u3066\u3044\u305f\u3060\u304d\u307e\u3057\u305f\u3002\u307e\u305f\u3001\u5ca1\u5cf6\u535a\u58eb\u3088\u308a\u3001\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u5e79\u4e8b\u9577\u3068\u3057\u3066\u306e\u8ffd\u60bc\u6587\u3092\u3044\u305f\u3060\u304d\u307e\u3057\u305f\u3002\u3053\u3053\u306b\u611f\u8b1d\u3092\u8868\u3057\u307e\u3059\u3002\u53c2\u8003\u6587\u732e[1]\u5bfa\u7530\u5f18\uff0e\u56fd\u969b\u5b66\u8853\u4ea4\u6d41\u3068\u533b\u85ac\u5316\u5b66\u90e8\u4f1a,MedchemNews,2,6-9(2003).[2]\u85e4\u7530\u7a14\u592b\uff0ePicolinicacid\u7cfb\u30aa\u30fc\u30ad\u30b7\u30f3\u9664\u8349\u5264\u306b\u304a\u3051\u308b\u69cb\u9020\u5909\u63db\uff0c\u65e5\u672c\u8fb2\u85ac\u5b66\u4f1a\u8a8c,42,28-32(2017).[3]Epp,J.B.,Schmitzer,P.R.,Crouse,G.D.Fiftyyearsofherbicideresearch:comparingdiscoveryoftrifluralinandhalauxifen-methyl,Pest.Manag.Sci.,74,9-16(2018).[4]Hannah,J.,Ruyle,W.V.,Jones,H.,Matzuk,A.R.,Kelly,K.W.,Witzel,B.E.,Holtz,W.J.,Houser,R.W.,Shen,T.Y.,Sarett,L.H.Discoveryofdiflunisal,Br.J.clin.Pharmac.,4,7S-13S(1977).[5]Dhagat,U.,Carbone,V.,Chung,R.P.,Matsunaga,T.,Endo,S.,Hara,A.,El-Kabbani,O.,Asalicylicacid-basedanaloguediscoveredfromvirtualscreeningasapotentinhibitorofhuman20\uf061-hydroxysteroiddehydrogenase,Med.Chem.,3,546-550(2007).[6]Dhagat,U.,Endo,S.,Sumii,R.,Hara,A.,El-Kabbani,O.Selectivitydeterminantsofinhibitorbindingtohuman20\uf061-hydroxysteroiddehydrogenase:crystalstructureoftheenzymeinternarycomplexwithcoenzymeandthepotentinhibitor3,5-dichlorosalicylicacid,J.Med.Chem.,51,4844-4848(2008).[7]Goodford,P.J.Acomputationalprocedurefordeterminingenergeticallyfavorablebindingsitesonbiologicallyimportantmacromolecules,J.Med.Chem.,28,849-857(1985).[8]El-Kabbani,O,Dhagat,U,Hara,A.,Inhibitorsofhuman20\u03b1-hydroxysteroiddehydrogenase(AKR1C1),J.SteroidBiochem.Mol.Biol.,125,105-111(2011).[9]http:\/\/infochim.u-strasbg.fr\/new\/FJ2008\/pdf\/Fujita.pdf,17\/12\/25\u95b2\u89a7[10]Billas,I.M.L.,Iwema,T.,Garnier,J.-M.,Mitschler,A.,Rochel,N.,Moras,D.Structuraladaptabilityintheligand-bindingpocketoftheecdysonehormonereceptor,Nature,426,91-96(2003).[11]\u4f0a\u85e4\u535a\u7d00\uff0e\u30aa\u30fc\u30ad\u30b7\u30f3\u53d7\u5bb9\u4f53TIR1\u3068\u30aa\u30fc\u30ad\u30b7\u30f3\u30b7\u30b0\u30ca\u30eb\u4f1d\u9054\uff0c\u690d\u7269\u306e\u751f\u9577\u8abf\u7bc0,42,37-44(2007).[12]Lucido,M.,Orlando,B.J.,Vecchio,A.J.,Malkowski,M.G.Thecrystalstructureofaspirinacetylatedhumancyclooxygenase-2:insightintotheformationofproductswithreversedstereochemistry,Biochemistry,55,1226-1238(2016).[13]Hansch,C.,Maloney,P.P.,Fujita,T.,Muir,R.M.CorrelationofbiologicalactivityofphenoxyaceticacidswithHammettsubstituentconstantsandpartitioncoefficients,Nature,194,178-180(1962).[14]Hansch,C.,Fujita,T.\uf072\uf02d\uf073\uf02d\uf070Analysis.Amethodforthecorrelationofbiologicalactivityandchemicalstructure,J.Am.Chem.Soc.,86,1616-1626(1964).[15]Fujita,T.,Iwasa,J.,Hansch,C.,Anewsubstituentconstant,\uf070,derivedfrompartitioncoefficients,J.Am.Chem.Soc.,86,5175-5180(1964).[16]Marin,Y.C.Hanschanalysis50yearson,Comput.Mol.Sci.,2,435-442(2012).[17]http:\/\/www.bunka.go.jp\/tokei_hakusho_shuppan\/tokeichosa\/kokugo_yoronchosa\/pdf\/h22_chosa_kekka.pdf,17\/12\/25\u95b2\u89a7\/\/\/\/\/CuttingEdge\/\/\/\/\/\u3042\u308b\u4f01\u696d\u7814\u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u305d\u306e\u7d50\u679c\u3001\u4e3b\u9396\u69cb\u9020\u306f\u4f3c\u3066\u3044\u308b\u304c\uff08C\u03b1RMSD=0.79\u212b\uff09\u3001\u6d3b\u6027\u4e2d\u5fc3\u306e\u57fa\u8cea\u8a8d\u8b58\u306b\u95a2\u4e0e\u3059\u308b\u91cd\u8981\u306a\u6b8b\u57fa\u306e\u3046\u30611\u6b8b\u57fa\u304c\u7570\u306a\u308b\u3053\u3068\u304c\u5224\u660e\u3057\u305f\u3002\u307e\u305f\u3001\u65e2\u77e5\u306eHAO\u963b\u5bb3\u5264\u306e\u30d5\u30a7\u30cb\u30eb\u30d2\u30c9\u30e9\u30b8\u30f3\u306b\u5bfe\u3059\u308b\u611f\u53d7\u6027\u3092N.europaea\u306e\u5c5e\u3059\u308b\u03b2-AOB\u3068N.oceani\u306e\u5c5e\u3059\u308b\u03b3-AOB\u9593\u3067\u6bd4\u8f03\u3057\u305f\u3068\u3053\u308d\u30013\u500d\u7a0b\u5ea6\u306e\u611f\u53d7\u6027\u306e\u5dee\u304c\u898b\u3089\u308c\u305f\uff08Nishigaya2016\uff09\u3002\u3053\u308c\u3089\u3088\u308a\u3001NeHAO\u304a\u3088\u3073NoHAO\u53cc\u65b9\u3092\u30e2\u30c7\u30eb\u306b\u7528\u3044\u3066\u85ac\u5264\u958b\u767a\u3092\u884c\u3046\u3053\u3068\u306b\u3057\u305f\u3002\u56f3\uff13NoHAO\u7d50\u6676\u69cb\u9020(A)\u3068NeHAO\/NoHAO\u4e3b\u9396\u69cb\u9020\u306e\u6bd4\u8f03(B)\u6b21\u306b\u3001\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u89e3\u6790\u3092\u7528\u3044\u3066\u963b\u5bb3\u5264\u306e\u63a2\u7d22\u3092\u884c\u3063\u305f\u3002NeHAO\u304a\u3088\u3073NoHAO\u7d50\u6676\u306b\u5bfe\u3057\u3066\u3001\u8907\u6570\u306e\u57fa\u8cea\u30df\u30df\u30c3\u30af\u5316\u5408\u7269\u3092\u30bd\u30fc\u30ad\u30f3\u30b0\u3059\u308b\u3053\u3068\u3067\u30012\u7a2e\u306e\u5316\u5408\u7269\u3068HAO\u306e\u5171\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u3092\u53d6\u5f97\u3057\u305f\u30022\u7a2e\u306e\u5316\u5408\u7269\u306eHAO\u7d50\u5408\u4f4d\u7f6e\u306f\u8fd1\u63a5\u3057\u3066\u3044\u305f\u305f\u3081\u3001\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u30d9\u30fc\u30b9\u30c7\u30b6\u30a4\u30f3\u3092\u6307\u5411\u3057\u305f\u30d5\u30a1\u30fc\u30de\u30b3\u30d5\u30a9\u30a2\u30b5\u30fc\u30c1\u3092\u5e02\u8ca9\u5316\u5408\u7269500\u4e07\u7a2e\u306b\u5bfe\u3057\u3066\u884c\u3044\u3001\u305d\u306e\u30d2\u30c3\u30c8\u304b\u308977\u5316\u5408\u7269\u3092\u8cfc\u5165\u3057\u305f\u3002\u540c\u6642\u306b\u7cbe\u88fdHAO\u3092\u7528\u3044\u305f\u65b0\u898f\u306a\u86cd\u5149\u6d3b\u6027\u6cd5\u306e\u958b\u767a\uff08384\u7a74\u30d7\u30ec\u30fc\u30c8\u4f7f\u7528\u6642\u30a2\u30c3\u30bb\u30a4\u7cbe\u5ea6\uff1aS\/B=22,Z\u2019\u5024=0.9\uff09\u3001\u304a\u3088\u3073Greiss\u8a66\u85ac\u3092\u7528\u3044\u305f\u751f\u83cc\u306e\u785d\u5316\u6d3b\u6027\u6e2c\u5b9a\u6cd5\u306e\u30cf\u30a4\u30b9\u30eb\u30fc\u30d7\u30c3\u30c8\u5316\u3092\u884c\u3063\u305f\uff08S\/B=9,Z\u2019\u5024=0.73\uff09\u3002\u3053\u308c\u3089\u30a2\u30c3\u30bb\u30a4\u6cd5\u3092\u4f7f\u304477\u5316\u5408\u7269\u3092\u691c\u8a3c\u3057\u305f\u3068\u3053\u308d\u3001\u6700\u3082\u963b\u5bb3\u52b9\u679c\u306e\u9ad8\u304b\u3063\u305f\u5316\u5408\u7269\u306f50\uff05\u963b\u5bb3\u6fc3\u5ea6\uff08IC50\uff09\u304c40nM\uff08\u7cbe\u88fdHAO\uff09\u304a\u3088\u30731.8\u03bcM\uff08\u57f9\u990a\u83cc\uff09\u3067\u3042\u3063\u305f\u3002\u3055\u3089\u306b\u3001\u3053\u306e\u65b0\u898f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u306e\u5468\u8fba\u5316\u5408\u7269\u3092\u7528\u3044\u3066\u7cbe\u88fdHAO\u304a\u3088\u3073\u83cc\u4f53\u306b\u5bfe\u3057\u3066\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u89e3\u6790\u3092\u884c\u3063\u305f\u3068\u3053\u308d\u3001\u5468\u8fba\u5316\u5408\u7269\u306b\u3082\u540c\u69d8\u306eHAO\u963b\u5bb3\u6d3b\u6027\u304a\u3088\u3073\u785d\u5316\u963b\u5bb3\u6d3b\u6027\u304c\u89b3\u6e2c\u3055\u308c\u305f\u3002\u3055\u3089\u306b\u65e2\u5b58\u85ac\u3068\u306e\u6bd4\u8f03\u306e\u305f\u3081\u3001\u65e2\u77e5\u306e\u785d\u5316\u6291\u5236\u5316\u5408\u726939\u7a2e\uff08\u3046\u3061\u4e0a\u5e02\u85ac14\u7a2e\uff09\u306e\u785d\u5316\u6d3b\u6027\u963b\u5bb3\u52b9\u679c\uff08IC50\uff09\u3092\u6e2c\u5b9a\u3057\u305f\u3002\u305d\u306e\u7d50\u679c\u3001\u65b0\u898f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u306f\u3001\u73fe\u5728\u4f7f\u308f\u308c\u3066\u3044\u308b\u4e0a\u5e02\u85ac3\u7a2e\uff08\u30cb\u30c8\u30e9\u30d4\u30ea\u30f3,\u30a8\u30c8\u30ea\u30b8\u30a2\u30be\u30fc\u30eb\u3001\u30b8\u30b7\u30a2\u30f3\u30b8\u30a2\u30df\u30c9\uff09\u3088\u308a\u3082\u5f37\u529b\u306a\u963b\u5bb3\u52b9\u679c\u3092\u6301\u3064\u3053\u3068\u304c\u5224\u660e\u3057\u305f\u3002\u56f34\u65e2\u5b58\u85ac\u3068\u65b0\u898f\u963b\u5bb3\u5264\u306e\u785d\u5316\u6291\u5236\u52b9\u679c\u306e\u6bd4\u8f034\u7a2e\u306e\u5316\u5408\u7269\u306eN.europaea\u751f\u83cc\u306b\u5bfe\u3059\u308b\u785d\u5316\u6291\u5236\u52b9\u679c\u3092\u6e2c\u5b9a\u3057\u305f\u3002\u785d\u5316\u6d3b\u6027\u306e\u6e2c\u5b9a\u306f\u3001Greiss\u8a66\u85ac\u306b\u3066\u4e9c\u785d\u9178\u751f\u6210\u91cf\u3092\u5b9a\u91cf\u3059\u308b\u3053\u3068\u3067\u884c\u3063\u305f\u30023.\u7d50\u8ad6\u672c\u7814\u7a76\u3067\u306f\u3001\u7cfb\u7d71\u7684\u306b\u96e2\u308c\u305fN.europaea\u3068N.oceani\u306e\u53cc\u65b9\u3092\u5bfe\u8c61\u306b\u3057\u305f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u958b\u767a\u6226\u7565\u306e\u91cd\u8981\u6027\u3092\u793a\u3057\u3001HAO\u306e\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u89e3\u6790\u3001\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u30d9\u30fc\u30b9\u306e\u85ac\u5264\u30c7\u30b6\u30a4\u30f3\u3001\u9175\u7d20\u304a\u3088\u3073\u83cc\u4f53\u30d9\u30fc\u30b9\u3067\u306e\u963b\u5bb3\u5264\u30a2\u30c3\u30bb\u30a4\u6cd5\u3092\u7528\u3044\u3066\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u5275\u51fa\u3092\u884c\u3063\u305f\u3002\u305d\u306e\u7d50\u679c\u3001\u5e02\u8ca9\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u306b\u5339\u6575\u3059\u308b\u963b\u5bb3\u6d3b\u6027\u3092\u6301\u3064\u65b0\u898f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u3092\u898b\u51fa\u3059\u3053\u3068\u306b\u6210\u529f\u3057\u305f\u3002\u3053\u306e\u5316\u5408\u7269\u306f\u3001\u7d50\u5408\u52b9\u7387\u6307\u6570\uff5bBEI=\u963b\u5bb3\u6d3b\u6027(pIC50)\/\u5206\u5b50\u8cea\u91cf(kDa)\uff5d\u304c61\u3068\u826f\u597d\u3067\u3042\u308a\u3001logP\u30820.7\u3068\u4f4e\u304f\u3001\u4f5c\u7528\u6a5f\u5e8f\u3082\u660e\u78ba\u3067\u3042\u308b\u305f\u3081\u3001\u5b98\u80fd\u57fa\u4ed8\u52a0\u306a\u3069\u306b\u3088\u308b\u4fee\u98fe\u306e\u4f59\u5730\u3092\u591a\u304f\u6b8b\u3057\u3066\u3044\u308b\u3002\u3088\u3063\u3066\u3001\u672c\u7814\u7a76\u306b\u304a\u3044\u3066\u898b\u3044\u3060\u3055\u308c\u305f\u65b0\u898f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u3068\u305d\u306e\u5468\u8fba\u5316\u5408\u7269\u306f\u3001\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u306e\u30ea\u30fc\u30c9\u5316\u5408\u7269\u5019\u88dc\u3068\u3057\u3066\u5341\u5206\u306a\u6027\u8cea\u3092\u6301\u3064\u5316\u5408\u7269\u3060\u3068\u3044\u3048\u308b\u30025.\u53c2\u8003\u6587\u732eNishigaya,Y.et.al,Biochem.Biophys.Res.Commun.476,127\u2013133(2016).P-05Physicochemicalanalysisofantigen-antibodyinteractionassociatedwithchargeexchangeofaminoacids\u25cbKouheiYOSHIDA1\u3001MasatoKIYOSHI1\u3001DaisukeKURODA1\u3001MakotoNAKAKIDO1\u3001SatoruNAGATOISHI1,2\u3001ShinjiSOGA3\u3001HirokiSHIRAI3\u3001KouheiTSUMOTO1,2\uff081GraduateSchoolofEngineering,UniversityofTokyo\u30012TheInstituteofMedicalSciences\u30013ModalityResearchLabs.AstellasPharmaInc.\uff09E-mail:k-yoshida@protein.t.u-tokyo.ac.jp1.IntroductionAntibodiesareexploitedfortherapeuticandbiotechnologicalpurposes,suchasincancerimmunotherapy,indiagnosis,andinmolecularbio-sensors.Recently,\u201cBiobetter\u201d,definedasthebiomedicineisdevelopingbytheevolutionofthemethodstooptimizethephysicochemicalpropertiesofanantibody.Forexample,miniaturizationofantibodytoincreasecellmembranepermeability,acquisitionoftheabilitytorecognizemultipleantigens[1],improvementofbindingaffinitybymutagenesisapproach[2],andsoon.However,theseoptimizationsarecannotbeappliedfreely.Toutilizeanddevelopthebiobetter-antibodies,itsphysicalproperties,suchasthestructuralstabilityorthebindingmodetotheantigen,havetobeinvestigatedprecisely.Forthatpurpose,itisnecessarytounderstandeacheffectofinteractioncausedbyeachresidue.Inthisresearch,wefocusedontheresiduesassociatedwiththeantigen-antibodybinding.Anantigen-antibodyreactioniscomposedinseveralkindsofinteraction:hydrogenbond,electrostaticinteraction(saltbridge),vanderWaalsforces,andhydrophobicinteraction.Amongthem,theelectrostaticinteractionisthestrongestinteraction,andtheforceofchargecanbecontrolledbymanipulatingitschargeresidue,thusthisisusefulforengineering.However,untilnow,thereislittlemolecularobservationhowimportanteachelectrostaticinteractionbetweentheantibodyanditsantigen.Herein,weaimedtoclarifythatbyinvestigatingtheeffectofexchangingthecharge,andproposetodevelopnewantibodyengineering.Forexample,somesubstances,suchasanendogenousmoleculecouldnotberecognizedasanantigen.Byinversingthechargeresidueofit,itsimmunogenicitywouldbeincreased,andtheantibodyformutantofthesubstance.Then,wecancreatethechargeexchangedantibody,whichcanrecognizetheoriginalsubstance(Fig.1).Fig.1Hypothesisofutilizingthechargeexchange2.MethodsTwomodelproteinswerechosenforthisresearch:antigen,Interferon-gammareceptor(IFNgR),anditsneutralizationantibody,A6.BothproteinswereexpressedinE.coli,andpurifiedwithmetalaffinitychromatographyandsizeexclusionchromatography.SurfacePlasmonResonance(SPR)wascarriedouttomeasuretheinteractionbetweenA6andIFNgR.ThesecondarystructureofeachproteinwasinvestigatedusingCircularDichroism(CD).DifferentialScanningCalorimetry(DSC)wasperformedtodecidethethermalstabilityofeachprotein.3.Results&#038;DiscussionSelectionofelectrostaticinteractionsWevisuallyselectedthreeelectrostaticinteractionsbetweentheextracellulardomainD1ofIFNgRandscFvantibodyA6:R84-E27,K98\u2013D28andK52\u2013D54&#038;D56,respectively(fromPDBcode1JRH)[3](Fig.2).Fig.2ThreeelectrostaticinteractionsbetweenIFNgRandA6RegulationoftheinteractionbyitschargeInSPRassay,wemeasuredthebindingresponseofA6toeachimmobilizedIFNgR(Fig.3).WepreparedthreeIFNgRmutants,R84E,K98DandK52D,whichwereinversedeachchargeresidue.WildtypeofA6showedaclearbindingresponsetowildtypeofIFNgR.Meanwhile,thesethreemutantsofIFNgRalmostlosttheabilityofbinding,becauseachargerepulsionwascausedontheinteractionsurface.Onlyonechargerepulsioncoulddisruptsuchastronginteraction.Fig.3SPRassaybetweeneachIFNgRandwildtypeofA6Then,wealsopreparedthreeA6mutants,E27R,D28KandD54KandD56KtorecovertheelectrostaticinteractionwitheachIFNgRmutant.Asaresult,E27RandD28KofA6showedtherecoveryofthebindingaffinitytoR84EandK98DofIFNgR,respectively.Ontheotherhand,therewasnorecoveryaboutK52DandD54K&#038;D56K.Fromtheviewpointofaffinity,kinetics,andthermodynamics,itwasclarifiedthatthesethreecombinationsofmutantshowedvariousresultsabouttheeffectofphysicalpropertybyexchangingthechargeresidueeachother(Fig.4).Fig.4SPRassaybetweeneachIFNgRandmutantsofA6EffectsofphysicalpropertybyexchangeFurtherphysicochemicalmeasurementstoeachIFNgRwereperformedtounderstandwhysuchadifferencewasobserved.Weinvestigatedeachconformationofchargedresidueinthemolecular.CDandDSCwerealsocarriedouttoclarifytheeffectsofthesemolecularconformations(Fig.5).Asaresult,itwassuggestedthatmaintainingthesecondarystructureandflexibilitywasthekeyfactorformanipulatingthechargeproperly.Fig.5EffectsofeachchargedresiduetotheconformationCurrently,weareperformingmoleculardynamicssimulationforeachinteractiontoaimtounderstandmoredeeplythevariouseffectsofphysicalproperty.4.References1.ChristophS,etal.,MolecularImmunology67,95-106(2015)2.KiyoshiM,etal.,PLOSONE9,e87099(2014)3.SogabeS,etal.,JournalofMolecularBiology273,882-897(1997)P-06\u7d50\u5408\u80fd\u5411\u4e0a\u306b\u5411\u3051\u305fBlaR1\u306e\u69cb\u9020\u6539\u5909\u25cb\u7686\u5ddd\u54091\u3001\u4e2d\u66fd\u8b721\u3001\u732a\u718a\u8cb4\u4e4b1\u3001\u5c0f\u677e\u514b\u4e00\u90ce2\u3001\u6885\u5c71\u79c0\u660e3\u3001\u95a2\u53e3\u54f21\u3001\uff081\u65e5\u672c\u88fd\u7c89\uff08\u682a\uff09\u30012\uff08\u682a\uff09\u30a4\u30f3\u30b7\u30ea\u30b3\u30b5\u30a4\u30a8\u30f3\u30b9\u30013\u4e2d\u592e\u5927\u2022\u7406\u5de5\uff09E-mail:s-minagawa@nippn.co.jp1.\u80cc\u666f\u3068\u76ee\u7684BlaR1(beta-lactamaseregulatoryprotein1)\u306f\u7d30\u83cc\u306e\u7d30\u80de\u819c\u306b\u5b58\u5728\u3057\u3001\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u7cfb\u6297\u751f\u7269\u8cea(\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0)\u306e\u691c\u51fa\u3092\u62c5\u3046\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u3067\u3042\u308b\u3002BlaR1\u306eC\u672b\u7aef\u30c9\u30e1\u30a4\u30f3\uff08BlaR-CTD\uff09\u3068\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u306e\u7d50\u5408\u60c5\u5831\u306f\u3001BlaR1\u3092\u4ecb\u3057\u3066\u7d30\u80de\u5185\u306b\u4f1d\u9054\u3055\u308c\u308b\u3002BlaR1\u306f\u3001\u5e83\u7bc4\u56f2\u306e\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u7d50\u5408\u3059\u308b\u3053\u3068\u304b\u3089\u3001\u98df\u6750\u306b\u6b8b\u5b58\u3059\u308b\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u306e\u691c\u51fa\u306b\u3082\u5229\u7528\u3055\u308c\u3066\u3044\u308b(1)\u3002\u7b46\u8005\u3089\u306f\u3001\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u306e\u7d50\u5408\u80fd\u304c\u5411\u4e0a\u3057\u305f\u3001\u6539\u5909\u578b\u306eBlaR1\u5275\u51fa\u3092\u76ee\u7684\u306b\u3001\u30ea\u30ac\u30f3\u30c9-\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u9593\u306e\u30c9\u30c3\u30ad\u30f3\u30b0\u30b7\u30df\u30e5\u30ec\u30fc\u30b7\u30e7\u30f3\u6280\u8853\u306e\u5fdc\u7528\u5c55\u958b\u3092\u8a66\u307f\u305f\u3002\u5373\u3061\u3001\u30ea\u30ac\u30f3\u30c9(\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0)\u3092\u56fa\u5b9a\u3057\u3001\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea(BlaR1)\u3092\u6539\u5909\u3059\u308b\u3001\u5f93\u6765\u3068\u306f\u9006\u306e\u30a2\u30d7\u30ed\u30fc\u30c1\u3067\u3042\u308b\u3002\u3055\u3089\u306b\u3001\u30b7\u30df\u30e5\u30ec\u30fc\u30b7\u30e7\u30f3\u306b\u3088\u3063\u3066\u5f97\u3089\u308c\u305f\u3001\u6539\u5909\u578b\u306eBlaR1\u3092\u7d44\u63db\u3048\u5927\u8178\u83cc\u306b\u3088\u308a\u751f\u7523\u3057\u3001\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u306e\u7d50\u5408\u80fd\u3092\u91ce\u751f\u578b\u3068\u6bd4\u8f03\u3059\u308b\u3053\u3068\u3067\u691c\u8a3c\u3092\u304a\u3053\u306a\u3063\u305f\u30022.\u65b9\u6cd5(1)\u6539\u5909\u578bBlaR1\u306e\u30e2\u30c7\u30ea\u30f3\u30b0\u5148\u305a\u3001BlaR-CTD\u306e\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u7acb\u4f53\u69cb\u9020\u30e2\u30c7\u30eb\u3092\u3001\u305d\u306e\u69cb\u9020\u985e\u4f3c\u4f53\u3067\u3042\u308b\u03b2-lactamase(\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u5206\u89e3\u9175\u7d20)\u306eX\u7dda\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u89e3\u6790\u30c7\u30fc\u30bf(3PAG_A)\u3092\u57fa\u306b\u4f5c\u88fd\u3057\u305f\u3002\u6b21\u306b\u3001\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u306e\u7d50\u5408\u90e8\u4f4d\u8fd1\u508d\u306e\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u306e\u5185\u3001\u6539\u5909\u306b\u3088\u3063\u3066\u7d50\u5408\u80fd\u306e\u5411\u4e0a\u304c\u671f\u5f85\u3055\u308c\u308b\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u9818\u57df\u3092\u7279\u5b9a\u3057\u305f\u3002\u7d9a\u3044\u3066\u3001\u7279\u5b9a\u3057\u305f\u9818\u57df\u306e\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u7f6e\u63db\u3092\u884c\u3044\u3001\u6539\u5909\u578bBlaR1-CTD\u306e\u7acb\u4f53\u69cb\u9020\u3092\u3001FAMS(2)\u3092\u7528\u3044\u3066\u69cb\u7bc9\u3057\u3001\u91ce\u751f\u578b\u3088\u308a\u3082\u69cb\u9020\u5b89\u5b9a\u6027\u306b\u512a\u308c\u308b\u3082\u306e\u3092\u9078\u629c\u3057\u305f\u3002\u6700\u5f8c\u306b\u3001\u7d44\u63db\u3048\u751f\u7523\u3057\u305f\u91ce\u751f\u578b\u3068\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u7f6e\u63db\u3057\u3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06e\u610f\u5473\u3092\u53d6\u308b\u306e\u304c\u9069\u5207\u3067\u3042\u308b\u3068\u601d\u308f\u308c\u308b\u3002\u300c\u69cb\u52b9\u300d\u306f\u8a00\u3046\u307e\u3067\u3082\u306a\u304f\u3001\u300c\u69cb\u9020\u300d\u3068\u300c\u52b9\u679c\u300d\u3001\u3059\u306a\u308f\u3061\u3001\u300c\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u300d\u306e\u3053\u3068\u3067\u3042\u308b\u3002\u3057\u305f\u304c\u3063\u3066\u3001\u300c\u9808\u7aae\u69cb\u52b9\u300d\u3068\u306f\u3001\u300c\uff08\u662f\u975e\u3068\u3082\uff09\u307f\u3093\u306a\u3001\uff08\u884c\u304d\u8a70\u307e\u308a\u3001\u56f0\u308b\u3053\u3068\u3082\u3042\u308b\u304b\u3082\u3057\u308c\u306a\u3044\u304c\uff09\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u3092\u7a81\u304d\u8a70\u3081\u3001\u3057\u3063\u304b\u308a\u3084\u308a\u307e\u3057\u3087\u3046\u300d\u3068\u3044\u3046\u610f\u5473\u3067\u3042\u308b\u3002\u308f\u308c\u308f\u308c\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u7814\u7a76\u306b\u95a2\u308f\u308b\u8005\u306f\u3001\u85e4\u7530\u5148\u751f\u304c\u6b8b\u3055\u308c\u305f\u3053\u306e\u719f\u8a9e\u3092\u3057\u3063\u304b\u308a\u3068\u80f8\u306b\u523b\u307f\u3001\u5c06\u6765\u306e\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u7814\u7a76\u306e\u767a\u5c55\u306b\u5bc4\u4e0e\u3057\u3066\u3044\u304b\u306a\u3051\u308c\u3070\u306a\u3089\u306a\u3044\u3068\u601d\u3063\u3066\u3044\u308b\u3002\u8b1d\u8f9e\u5bfa\u7530\u5148\u751f\u3001\u4e2d\u5ddd\u5148\u751f\u3088\u308a\u3001\u30bb\u30c3\u30b7\u30e7\u30f3\u3067\u4f7f\u7528\u3055\u308c\u305f\u30b9\u30e9\u30a4\u30c9\u304a\u3088\u3073\u60c5\u5831\u3092\u3044\u305f\u3060\u304d\u3001\u53c2\u8003\u304a\u3088\u3073\u5199\u771f\u306e\u8ee2\u8f09\u3092\u3055\u305b\u3066\u3044\u305f\u3060\u304d\u307e\u3057\u305f\u3002\u307e\u305f\u3001\u5ca1\u5cf6\u535a\u58eb\u3088\u308a\u3001\u85e4\u7530\u30ab\u30f3\u30d5\u30a1\u30ec\u30f3\u30b9\u5e79\u4e8b\u9577\u3068\u3057\u3066\u306e\u8ffd\u60bc\u6587\u3092\u3044\u305f\u3060\u304d\u307e\u3057\u305f\u3002\u3053\u3053\u306b\u611f\u8b1d\u3092\u8868\u3057\u307e\u3059\u3002\u53c2\u8003\u6587\u732e[1]\u5bfa\u7530\u5f18\uff0e\u56fd\u969b\u5b66\u8853\u4ea4\u6d41\u3068\u533b\u85ac\u5316\u5b66\u90e8\u4f1a,MedchemNews,2,6-9(2003).[2]\u85e4\u7530\u7a14\u592b\uff0ePicolinicacid\u7cfb\u30aa\u30fc\u30ad\u30b7\u30f3\u9664\u8349\u5264\u306b\u304a\u3051\u308b\u69cb\u9020\u5909\u63db\uff0c\u65e5\u672c\u8fb2\u85ac\u5b66\u4f1a\u8a8c,42,28-32(2017).[3]Epp,J.B.,Schmitzer,P.R.,Crouse,G.D.Fiftyyearsofherbicideresearch:comparingdiscoveryoftrifluralinandhalauxifen-methyl,Pest.Manag.Sci.,74,9-16(2018).[4]Hannah,J.,Ruyle,W.V.,Jones,H.,Matzuk,A.R.,Kelly,K.W.,Witzel,B.E.,Holtz,W.J.,Houser,R.W.,Shen,T.Y.,Sarett,L.H.Discoveryofdiflunisal,Br.J.clin.Pharmac.,4,7S-13S(1977).[5]Dhagat,U.,Carbone,V.,Chung,R.P.,Matsunaga,T.,Endo,S.,Hara,A.,El-Kabbani,O.,Asalicylicacid-basedanaloguediscoveredfromvirtualscreeningasapotentinhibitorofhuman20\uf061-hydroxysteroiddehydrogenase,Med.Chem.,3,546-550(2007).[6]Dhagat,U.,Endo,S.,Sumii,R.,Hara,A.,El-Kabbani,O.Selectivitydeterminantsofinhibitorbindingtohuman20\uf061-hydroxysteroiddehydrogenase:crystalstructureoftheenzymeinternarycomplexwithcoenzymeandthepotentinhibitor3,5-dichlorosalicylicacid,J.Med.Chem.,51,4844-4848(2008).[7]Goodford,P.J.Acomputationalprocedurefordeterminingenergeticallyfavorablebindingsitesonbiologicallyimportantmacromolecules,J.Med.Chem.,28,849-857(1985).[8]El-Kabbani,O,Dhagat,U,Hara,A.,Inhibitorsofhuman20\u03b1-hydroxysteroiddehydrogenase(AKR1C1),J.SteroidBiochem.Mol.Biol.,125,105-111(2011).[9]http:\/\/infochim.u-strasbg.fr\/new\/FJ2008\/pdf\/Fujita.pdf,17\/12\/25\u95b2\u89a7[10]Billas,I.M.L.,Iwema,T.,Garnier,J.-M.,Mitschler,A.,Rochel,N.,Moras,D.Structuraladaptabilityintheligand-bindingpocketoftheecdysonehormonereceptor,Nature,426,91-96(2003).[11]\u4f0a\u85e4\u535a\u7d00\uff0e\u30aa\u30fc\u30ad\u30b7\u30f3\u53d7\u5bb9\u4f53TIR1\u3068\u30aa\u30fc\u30ad\u30b7\u30f3\u30b7\u30b0\u30ca\u30eb\u4f1d\u9054\uff0c\u690d\u7269\u306e\u751f\u9577\u8abf\u7bc0,42,37-44(2007).[12]Lucido,M.,Orlando,B.J.,Vecchio,A.J.,Malkowski,M.G.Thecrystalstructureofaspirinacetylatedhumancyclooxygenase-2:insightintotheformationofproductswithreversedstereochemistry,Biochemistry,55,1226-1238(2016).[13]Hansch,C.,Maloney,P.P.,Fujita,T.,Muir,R.M.CorrelationofbiologicalactivityofphenoxyaceticacidswithHammettsubstituentconstantsandpartitioncoefficients,Nature,194,178-180(1962).[14]Hansch,C.,Fujita,T.\uf072\uf02d\uf073\uf02d\uf070Analysis.Amethodforthecorrelationofbiologicalactivityandchemicalstructure,J.Am.Chem.Soc.,86,1616-1626(1964).[15]Fujita,T.,Iwasa,J.,Hansch,C.,Anewsubstituentconstant,\uf070,derivedfrompartitioncoefficients,J.Am.Chem.Soc.,86,5175-5180(1964).[16]Marin,Y.C.Hanschanalysis50yearson,Comput.Mol.Sci.,2,435-442(2012).[17]http:\/\/www.bunka.go.jp\/tokei_hakusho_shuppan\/tokeichosa\/kokugo_yoronchosa\/pdf\/h22_chosa_kekka.pdf,17\/12\/25\u95b2\u89a7\/\/\/\/\/CuttingEdge\/\/\/\/\/\u3042\u308b\u4f01\u696d\u7814\u7a76\u8005\u306e\u7c73\u56fd\u7814\u7a76\u30b5\u30d0\u30a4\u30d0\u30eb\u8a18Bristol-MyersSquibbCompany(USA):Pharmacology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fa\u304c\u7570\u306a\u308b\u3053\u3068\u304c\u5224\u660e\u3057\u305f\u3002\u307e\u305f\u3001\u65e2\u77e5\u306eHAO\u963b\u5bb3\u5264\u306e\u30d5\u30a7\u30cb\u30eb\u30d2\u30c9\u30e9\u30b8\u30f3\u306b\u5bfe\u3059\u308b\u611f\u53d7\u6027\u3092N.europaea\u306e\u5c5e\u3059\u308b\u03b2-AOB\u3068N.oceani\u306e\u5c5e\u3059\u308b\u03b3-AOB\u9593\u3067\u6bd4\u8f03\u3057\u305f\u3068\u3053\u308d\u30013\u500d\u7a0b\u5ea6\u306e\u611f\u53d7\u6027\u306e\u5dee\u304c\u898b\u3089\u308c\u305f\uff08Nishigaya2016\uff09\u3002\u3053\u308c\u3089\u3088\u308a\u3001NeHAO\u304a\u3088\u3073NoHAO\u53cc\u65b9\u3092\u30e2\u30c7\u30eb\u306b\u7528\u3044\u3066\u85ac\u5264\u958b\u767a\u3092\u884c\u3046\u3053\u3068\u306b\u3057\u305f\u3002\u56f3\uff13NoHAO\u7d50\u6676\u69cb\u9020(A)\u3068NeHAO\/NoHAO\u4e3b\u9396\u69cb\u9020\u306e\u6bd4\u8f03(B)\u6b21\u306b\u3001\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u89e3\u6790\u3092\u7528\u3044\u3066\u963b\u5bb3\u5264\u306e\u63a2\u7d22\u3092\u884c\u3063\u305f\u3002NeHAO\u304a\u3088\u3073NoHAO\u7d50\u6676\u306b\u5bfe\u3057\u3066\u3001\u8907\u6570\u306e\u57fa\u8cea\u30df\u30df\u30c3\u30af\u5316\u5408\u7269\u3092\u30bd\u30fc\u30ad\u30f3\u30b0\u3059\u308b\u3053\u3068\u3067\u30012\u7a2e\u306e\u5316\u5408\u7269\u3068HAO\u306e\u5171\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u3092\u53d6\u5f97\u3057\u305f\u30022\u7a2e\u306e\u5316\u5408\u7269\u306eHAO\u7d50\u5408\u4f4d\u7f6e\u306f\u8fd1\u63a5\u3057\u3066\u3044\u305f\u305f\u3081\u3001\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u30d9\u30fc\u30b9\u30c7\u30b6\u30a4\u30f3\u3092\u6307\u5411\u3057\u305f\u30d5\u30a1\u30fc\u30de\u30b3\u30d5\u30a9\u30a2\u30b5\u30fc\u30c1\u3092\u5e02\u8ca9\u5316\u5408\u7269500\u4e07\u7a2e\u306b\u5bfe\u3057\u3066\u884c\u3044\u3001\u305d\u306e\u30d2\u30c3\u30c8\u304b\u308977\u5316\u5408\u7269\u3092\u8cfc\u5165\u3057\u305f\u3002\u540c\u6642\u306b\u7cbe\u88fdHAO\u3092\u7528\u3044\u305f\u65b0\u898f\u306a\u86cd\u5149\u6d3b\u6027\u6cd5\u306e\u958b\u767a\uff08384\u7a74\u30d7\u30ec\u30fc\u30c8\u4f7f\u7528\u6642\u30a2\u30c3\u30bb\u30a4\u7cbe\u5ea6\uff1aS\/B=22,Z\u2019\u5024=0.9\uff09\u3001\u304a\u3088\u3073Greiss\u8a66\u85ac\u3092\u7528\u3044\u305f\u751f\u83cc\u306e\u785d\u5316\u6d3b\u6027\u6e2c\u5b9a\u6cd5\u306e\u30cf\u30a4\u30b9\u30eb\u30fc\u30d7\u30c3\u30c8\u5316\u3092\u884c\u3063\u305f\uff08S\/B=9,Z\u2019\u5024=0.73\uff09\u3002\u3053\u308c\u3089\u30a2\u30c3\u30bb\u30a4\u6cd5\u3092\u4f7f\u304477\u5316\u5408\u7269\u3092\u691c\u8a3c\u3057\u305f\u3068\u3053\u308d\u3001\u6700\u3082\u963b\u5bb3\u52b9\u679c\u306e\u9ad8\u304b\u3063\u305f\u5316\u5408\u7269\u306f50\uff05\u963b\u5bb3\u6fc3\u5ea6\uff08IC50\uff09\u304c40nM\uff08\u7cbe\u88fdHAO\uff09\u304a\u3088\u30731.8\u03bcM\uff08\u57f9\u990a\u83cc\uff09\u3067\u3042\u3063\u305f\u3002\u3055\u3089\u306b\u3001\u3053\u306e\u65b0\u898f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u306e\u5468\u8fba\u5316\u5408\u7269\u3092\u7528\u3044\u3066\u7cbe\u88fdHAO\u304a\u3088\u3073\u83cc\u4f53\u306b\u5bfe\u3057\u3066\u69cb\u9020\u6d3b\u6027\u76f8\u95a2\u89e3\u6790\u3092\u884c\u3063\u305f\u3068\u3053\u308d\u3001\u5468\u8fba\u5316\u5408\u7269\u306b\u3082\u540c\u69d8\u306eHAO\u963b\u5bb3\u6d3b\u6027\u304a\u3088\u3073\u785d\u5316\u963b\u5bb3\u6d3b\u6027\u304c\u89b3\u6e2c\u3055\u308c\u305f\u3002\u3055\u3089\u306b\u65e2\u5b58\u85ac\u3068\u306e\u6bd4\u8f03\u306e\u305f\u3081\u3001\u65e2\u77e5\u306e\u785d\u5316\u6291\u5236\u5316\u5408\u726939\u7a2e\uff08\u3046\u3061\u4e0a\u5e02\u85ac14\u7a2e\uff09\u306e\u785d\u5316\u6d3b\u6027\u963b\u5bb3\u52b9\u679c\uff08IC50\uff09\u3092\u6e2c\u5b9a\u3057\u305f\u3002\u305d\u306e\u7d50\u679c\u3001\u65b0\u898f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u306f\u3001\u73fe\u5728\u4f7f\u308f\u308c\u3066\u3044\u308b\u4e0a\u5e02\u85ac3\u7a2e\uff08\u30cb\u30c8\u30e9\u30d4\u30ea\u30f3,\u30a8\u30c8\u30ea\u30b8\u30a2\u30be\u30fc\u30eb\u3001\u30b8\u30b7\u30a2\u30f3\u30b8\u30a2\u30df\u30c9\uff09\u3088\u308a\u3082\u5f37\u529b\u306a\u963b\u5bb3\u52b9\u679c\u3092\u6301\u3064\u3053\u3068\u304c\u5224\u660e\u3057\u305f\u3002\u56f34\u65e2\u5b58\u85ac\u3068\u65b0\u898f\u963b\u5bb3\u5264\u306e\u785d\u5316\u6291\u5236\u52b9\u679c\u306e\u6bd4\u8f034\u7a2e\u306e\u5316\u5408\u7269\u306eN.europaea\u751f\u83cc\u306b\u5bfe\u3059\u308b\u785d\u5316\u6291\u5236\u52b9\u679c\u3092\u6e2c\u5b9a\u3057\u305f\u3002\u785d\u5316\u6d3b\u6027\u306e\u6e2c\u5b9a\u306f\u3001Greiss\u8a66\u85ac\u306b\u3066\u4e9c\u785d\u9178\u751f\u6210\u91cf\u3092\u5b9a\u91cf\u3059\u308b\u3053\u3068\u3067\u884c\u3063\u305f\u30023.\u7d50\u8ad6\u672c\u7814\u7a76\u3067\u306f\u3001\u7cfb\u7d71\u7684\u306b\u96e2\u308c\u305fN.europaea\u3068N.oceani\u306e\u53cc\u65b9\u3092\u5bfe\u8c61\u306b\u3057\u305f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u958b\u767a\u6226\u7565\u306e\u91cd\u8981\u6027\u3092\u793a\u3057\u3001HAO\u306e\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u89e3\u6790\u3001\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u30d9\u30fc\u30b9\u306e\u85ac\u5264\u30c7\u30b6\u30a4\u30f3\u3001\u9175\u7d20\u304a\u3088\u3073\u83cc\u4f53\u30d9\u30fc\u30b9\u3067\u306e\u963b\u5bb3\u5264\u30a2\u30c3\u30bb\u30a4\u6cd5\u3092\u7528\u3044\u3066\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u5275\u51fa\u3092\u884c\u3063\u305f\u3002\u305d\u306e\u7d50\u679c\u3001\u5e02\u8ca9\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u306b\u5339\u6575\u3059\u308b\u963b\u5bb3\u6d3b\u6027\u3092\u6301\u3064\u65b0\u898f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u3092\u898b\u51fa\u3059\u3053\u3068\u306b\u6210\u529f\u3057\u305f\u3002\u3053\u306e\u5316\u5408\u7269\u306f\u3001\u7d50\u5408\u52b9\u7387\u6307\u6570\uff5bBEI=\u963b\u5bb3\u6d3b\u6027(pIC50)\/\u5206\u5b50\u8cea\u91cf(kDa)\uff5d\u304c61\u3068\u826f\u597d\u3067\u3042\u308a\u3001logP\u30820.7\u3068\u4f4e\u304f\u3001\u4f5c\u7528\u6a5f\u5e8f\u3082\u660e\u78ba\u3067\u3042\u308b\u305f\u3081\u3001\u5b98\u80fd\u57fa\u4ed8\u52a0\u306a\u3069\u306b\u3088\u308b\u4fee\u98fe\u306e\u4f59\u5730\u3092\u591a\u304f\u6b8b\u3057\u3066\u3044\u308b\u3002\u3088\u3063\u3066\u3001\u672c\u7814\u7a76\u306b\u304a\u3044\u3066\u898b\u3044\u3060\u3055\u308c\u305f\u65b0\u898f\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u5019\u88dc\u3068\u305d\u306e\u5468\u8fba\u5316\u5408\u7269\u306f\u3001\u785d\u5316\u6291\u5236\u5264\u306e\u30ea\u30fc\u30c9\u5316\u5408\u7269\u5019\u88dc\u3068\u3057\u3066\u5341\u5206\u306a\u6027\u8cea\u3092\u6301\u3064\u5316\u5408\u7269\u3060\u3068\u3044\u3048\u308b\u30025.\u53c2\u8003\u6587\u732eNishigaya,Y.et.al,Biochem.Biophys.Res.Commun.476,127\u2013133(2016).P-05Physicochemicalanalysisofantigen-antibodyinteractionassociatedwithchargeexchangeofaminoacids\u25cbKouheiYOSHIDA1\u3001MasatoKIYOSHI1\u3001DaisukeKURODA1\u3001MakotoNAKAKIDO1\u3001SatoruNAGATOISHI1,2\u3001ShinjiSOGA3\u3001HirokiSHIRAI3\u3001KouheiTSUMOTO1,2\uff081GraduateSchoolofEngineering,UniversityofTokyo\u30012TheInstituteofMedicalSciences\u30013ModalityResearchLabs.AstellasPharmaInc.\uff09E-mail:k-yoshida@protein.t.u-tokyo.ac.jp1.IntroductionAntibodiesareexploitedfortherapeuticandbiotechnologicalpurposes,suchasincancerimmunotherapy,indiagnosis,andinmolecularbio-sensors.Recently,\u201cBiobetter\u201d,definedasthebiomedicineisdevelopingbytheevolutionofthemethodstooptimizethephysicochemicalpropertiesofanantibody.Forexample,miniaturizationofantibodytoincreasecellmembranepermeability,acquisitionoftheabilitytorecognizemultipleantigens[1],improvementofbindingaffinitybymutagenesisapproach[2],andsoon.However,theseoptimizationsarecannotbeappliedfreely.Toutilizeanddevelopthebiobetter-antibodies,itsphysicalproperties,suchasthestructuralstabilityorthebindingmodetotheantigen,havetobeinvestigatedprecisely.Forthatpurpose,itisnecessarytounderstandeacheffectofinteractioncausedbyeachresidue.Inthisresearch,wefocusedontheresiduesassociatedwiththeantigen-antibodybinding.Anantigen-antibodyreactioniscomposedinseveralkindsofinteraction:hydrogenbond,electrostaticinteraction(saltbridge),vanderWaalsforces,andhydrophobicinteraction.Amongthem,theelectrostaticinteractionisthestrongestinteraction,andtheforceofchargecanbecontrolledbymanipulatingitschargeresidue,thusthisisusefulforengineering.However,untilnow,thereislittlemolecularobservationhowimportanteachelectrostaticinteractionbetweentheantibodyanditsantigen.Herein,weaimedtoclarifythatbyinvestigatingtheeffectofexchangingthecharge,andproposetodevelopnewantibodyengineering.Forexample,somesubstances,suchasanendogenousmoleculecouldnotberecognizedasanantigen.Byinversingthechargeresidueofit,itsimmunogenicitywouldbeincreased,andtheantibodyformutantofthesubstance.Then,wecancreatethechargeexchangedantibody,whichcanrecognizetheoriginalsubstance(Fig.1).Fig.1Hypothesisofutilizingthechargeexchange2.MethodsTwomodelproteinswerechosenforthisresearch:antigen,Interferon-gammareceptor(IFNgR),anditsneutralizationantibody,A6.BothproteinswereexpressedinE.coli,andpurifiedwithmetalaffinitychromatographyandsizeexclusionchromatography.SurfacePlasmonResonance(SPR)wascarriedouttomeasuretheinteractionbetweenA6andIFNgR.ThesecondarystructureofeachproteinwasinvestigatedusingCircularDichroism(CD).DifferentialScanningCalorimetry(DSC)wasperformedtodecidethethermalstabilityofeachprotein.3.Results&#038;DiscussionSelectionofelectrostaticinteractionsWevisuallyselectedthreeelectrostaticinteractionsbetweentheextracellulardomainD1ofIFNgRandscFvantibodyA6:R84-E27,K98\u2013D28andK52\u2013D54&#038;D56,respectively(fromPDBcode1JRH)[3](Fig.2).Fig.2ThreeelectrostaticinteractionsbetweenIFNgRandA6RegulationoftheinteractionbyitschargeInSPRassay,wemeasuredthebindingresponseofA6toeachimmobilizedIFNgR(Fig.3).WepreparedthreeIFNgRmutants,R84E,K98DandK52D,whichwereinversedeachchargeresidue.WildtypeofA6showedaclearbindingresponsetowildtypeofIFNgR.Meanwhile,thesethreemutantsofIFNgRalmostlosttheabilityofbinding,becauseachargerepulsionwascausedontheinteractionsurface.Onlyonechargerepulsioncoulddisruptsuchastronginteraction.Fig.3SPRassaybetweeneachIFNgRandwildtypeofA6Then,wealsopreparedthreeA6mutants,E27R,D28KandD54KandD56KtorecovertheelectrostaticinteractionwitheachIFNgRmutant.Asaresult,E27RandD28KofA6showedtherecoveryofthebindingaffinitytoR84EandK98DofIFNgR,respectively.Ontheotherhand,therewasnorecoveryaboutK52DandD54K&#038;D56K.Fromtheviewpointofaffinity,kinetics,andthermodynamics,itwasclarifiedthatthesethreecombinationsofmutantshowedvariousresultsabouttheeffectofphysicalpropertybyexchangingthechargeresidueeachother(Fig.4).Fig.4SPRassaybetweeneachIFNgRandmutantsofA6EffectsofphysicalpropertybyexchangeFurtherphysicochemicalmeasurementstoeachIFNgRwereperformedtounderstandwhysuchadifferencewasobserved.Weinvestigatedeachconformationofchargedresidueinthemolecular.CDandDSCwerealsocarriedouttoclarifytheeffectsofthesemolecularconformations(Fig.5).Asaresult,itwassuggestedthatmaintainingthesecondarystructureandflexibilitywasthekeyfactorformanipulatingthechargeproperly.Fig.5EffectsofeachchargedresiduetotheconformationCurrently,weareperformingmoleculardynamicssimulationforeachinteractiontoaimtounderstandmoredeeplythevariouseffectsofphysicalproperty.4.References1.ChristophS,etal.,MolecularImmunology67,95-106(2015)2.KiyoshiM,etal.,PLOSONE9,e87099(2014)3.SogabeS,etal.,JournalofMolecularBiology273,882-897(1997)P-06\u7d50\u5408\u80fd\u5411\u4e0a\u306b\u5411\u3051\u305fBlaR1\u306e\u69cb\u9020\u6539\u5909\u25cb\u7686\u5ddd\u54091\u3001\u4e2d\u66fd\u8b721\u3001\u732a\u718a\u8cb4\u4e4b1\u3001\u5c0f\u677e\u514b\u4e00\u90ce2\u3001\u6885\u5c71\u79c0\u660e3\u3001\u95a2\u53e3\u54f21\u3001\uff081\u65e5\u672c\u88fd\u7c89\uff08\u682a\uff09\u30012\uff08\u682a\uff09\u30a4\u30f3\u30b7\u30ea\u30b3\u30b5\u30a4\u30a8\u30f3\u30b9\u30013\u4e2d\u592e\u5927\u2022\u7406\u5de5\uff09E-mail:s-minagawa@nippn.co.jp1.\u80cc\u666f\u3068\u76ee\u7684BlaR1(beta-lactamaseregulatoryprotein1)\u306f\u7d30\u83cc\u306e\u7d30\u80de\u819c\u306b\u5b58\u5728\u3057\u3001\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u7cfb\u6297\u751f\u7269\u8cea(\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0)\u306e\u691c\u51fa\u3092\u62c5\u3046\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u3067\u3042\u308b\u3002BlaR1\u306eC\u672b\u7aef\u30c9\u30e1\u30a4\u30f3\uff08BlaR-CTD\uff09\u3068\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u306e\u7d50\u5408\u60c5\u5831\u306f\u3001BlaR1\u3092\u4ecb\u3057\u3066\u7d30\u80de\u5185\u306b\u4f1d\u9054\u3055\u308c\u308b\u3002BlaR1\u306f\u3001\u5e83\u7bc4\u56f2\u306e\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u7d50\u5408\u3059\u308b\u3053\u3068\u304b\u3089\u3001\u98df\u6750\u306b\u6b8b\u5b58\u3059\u308b\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u306e\u691c\u51fa\u306b\u3082\u5229\u7528\u3055\u308c\u3066\u3044\u308b(1)\u3002\u7b46\u8005\u3089\u306f\u3001\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u306e\u7d50\u5408\u80fd\u304c\u5411\u4e0a\u3057\u305f\u3001\u6539\u5909\u578b\u306eBlaR1\u5275\u51fa\u3092\u76ee\u7684\u306b\u3001\u30ea\u30ac\u30f3\u30c9-\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u9593\u306e\u30c9\u30c3\u30ad\u30f3\u30b0\u30b7\u30df\u30e5\u30ec\u30fc\u30b7\u30e7\u30f3\u6280\u8853\u306e\u5fdc\u7528\u5c55\u958b\u3092\u8a66\u307f\u305f\u3002\u5373\u3061\u3001\u30ea\u30ac\u30f3\u30c9(\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0)\u3092\u56fa\u5b9a\u3057\u3001\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea(BlaR1)\u3092\u6539\u5909\u3059\u308b\u3001\u5f93\u6765\u3068\u306f\u9006\u306e\u30a2\u30d7\u30ed\u30fc\u30c1\u3067\u3042\u308b\u3002\u3055\u3089\u306b\u3001\u30b7\u30df\u30e5\u30ec\u30fc\u30b7\u30e7\u30f3\u306b\u3088\u3063\u3066\u5f97\u3089\u308c\u305f\u3001\u6539\u5909\u578b\u306eBlaR1\u3092\u7d44\u63db\u3048\u5927\u8178\u83cc\u306b\u3088\u308a\u751f\u7523\u3057\u3001\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u306e\u7d50\u5408\u80fd\u3092\u91ce\u751f\u578b\u3068\u6bd4\u8f03\u3059\u308b\u3053\u3068\u3067\u691c\u8a3c\u3092\u304a\u3053\u306a\u3063\u305f\u30022.\u65b9\u6cd5(1)\u6539\u5909\u578bBlaR1\u306e\u30e2\u30c7\u30ea\u30f3\u30b0\u5148\u305a\u3001BlaR-CTD\u306e\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u7acb\u4f53\u69cb\u9020\u30e2\u30c7\u30eb\u3092\u3001\u305d\u306e\u69cb\u9020\u985e\u4f3c\u4f53\u3067\u3042\u308b\u03b2-lactamase(\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u5206\u89e3\u9175\u7d20)\u306eX\u7dda\u7d50\u6676\u69cb\u9020\u89e3\u6790\u30c7\u30fc\u30bf(3PAG_A)\u3092\u57fa\u306b\u4f5c\u88fd\u3057\u305f\u3002\u6b21\u306b\u3001\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u306e\u7d50\u5408\u90e8\u4f4d\u8fd1\u508d\u306e\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u306e\u5185\u3001\u6539\u5909\u306b\u3088\u3063\u3066\u7d50\u5408\u80fd\u306e\u5411\u4e0a\u304c\u671f\u5f85\u3055\u308c\u308b\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u9818\u57df\u3092\u7279\u5b9a\u3057\u305f\u3002\u7d9a\u3044\u3066\u3001\u7279\u5b9a\u3057\u305f\u9818\u57df\u306e\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u7f6e\u63db\u3092\u884c\u3044\u3001\u6539\u5909\u578bBlaR1-CTD\u306e\u7acb\u4f53\u69cb\u9020\u3092\u3001FAMS(2)\u3092\u7528\u3044\u3066\u69cb\u7bc9\u3057\u3001\u91ce\u751f\u578b\u3088\u308a\u3082\u69cb\u9020\u5b89\u5b9a\u6027\u306b\u512a\u308c\u308b\u3082\u306e\u3092\u9078\u629c\u3057\u305f\u3002\u6700\u5f8c\u306b\u3001\u7d44\u63db\u3048\u751f\u7523\u3057\u305f\u91ce\u751f\u578b\u3068\u30a2\u30df\u30ce\u9178\u7f6e\u63db\u3057\u305f\u6539\u5909\u578bBlaR1-CTD\u306e\u03b2\u30e9\u30af\u30bf\u30e0\u3068\u306e\u7d50\u5408\u80fd\u3092\u6e2c\u5b9a\u3057\u305f\u3002\u4ee5\u4e0b\u3001\u5177\u4f53\u7684\u5185\u5bb9\u3092\u793a\u3059\u3002(1)-1\u03b2-lactamase\u9593\u3067\u306e\u7acb\u4f53\u69cb\u9020\u6bd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0b0\u30b9\u30b3\u30a2+0.997X\u5316\u5408\u7269\u306e\u56de\u8ee2\u53ef\u80fd\u7d50\u5408\u6570+7.833\u6587\u732e[3]~[7]\u304b\u3089\u65e2\u77e5\u963b\u5bb3\u526424\u500b\u306e\u69cb\u9020\u3068\u6d3b\u6027\u30c7\u30fc\u30bf\u3092\u5f97\u3066\u3001pIC50\u5024\ufffd5.00\u306e\u5316\u5408\u7269(6\u500b)\u3092\u300c\u6d3b\u6027\u3042\u308a\u300d\u3001pIC50\ufffd3.00\u306e\u5316\u5408\u7269(4\u500b)\u3092\u300c\u6d3b\u6027\u306a\u3057\u300d\u3068\u5b9a\u7fa9\u3057\u305f\u3002\u3053\u308c\u3089\u306e\u5316\u5408\u7269\u306e\u30c9\u30c3\u30ad\u30f3\u30b0\u30b9\u30b3\u30a2\u3068\u5316\u5408\u7269\u306e\u56de\u8ee2\u53ef\u80fd\u7d50\u5408\u6570\u3092\u7528\u3044\u3066\u5224\u5225\u5f0f\u3092\u4f5c\u6210\u3057\u3001100%\u306e\u6b63\u7b54\u7387\u3067\u5316\u5408\u7269\u3092\u5224\u5225\u3059\u308b\u3053\u3068\u304c\u51fa\u6765\u305f\u30022-4.\u6700\u7d42\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u9078\u52252-4-1.\u4e00\u6b21\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u7269\u6027\u4e88\u6e2c\u30fbMM-GBSA\u8a08\u7b97Qikprop\u3092\u7528\u3044\u3066\u3001\u5224\u5225\u5f0f\u4f5c\u6210\u306b\u4f7f\u7528\u3057\u305f10\u5316\u5408\u7269\u3068\u4e00\u6b21\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u7269\u6027\u4e88\u6e2c\u3092\u884c\u306a\u3063\u305f\u3002\u300c\u6d3b\u6027\u3042\u308a\u300d\u3068\u300c\u6d3b\u6027\u306a\u3057\u300d\u306e\u5316\u5408\u7269\u3067\u5927\u304d\u304f\u5dee\u304c\u898b\u3089\u308c\u305fFOSA(\u5168\u6eb6\u5a92\u63a5\u89e6\u53ef\u80fd\u8868\u9762\u7a4dSASA\u306e\u758e\u6c34\u6027\u6210\u5206)\u306e\u5024\u3092\u7528\u3044\u3066\u3001\u5316\u5408\u7269\u306e\u7d5e\u308a\u8fbc\u307f\u3092\u884c\u306a\u3063\u305f\u3002\u3055\u3089\u306b\u3001Prime\u3092\u7528\u3044\u3066\u4e00\u6b21\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306eMM-GBSA\u8a08\u7b97\u3092\u884c\u306a\u3044\u3001MM-GBSA\u5024\u304c\u3042\u307e\u308a\u826f\u304f\u306a\u3044\u5316\u5408\u7269(MM-GBSA\ufffd-40)\u306f\u9664\u304d\u3001\u305d\u306e\u7d50\u679c\u6b8b\u3063\u305f\u5316\u5408\u7269\u3092\u4e8c\u6b21\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u3068\u3057\u305f\u30022-4-2.\u4e8c\u6b21\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u30af\u30e9\u30b9\u30bf\u30ea\u30f3\u30b0\u4e8c\u6b21\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u30af\u30e9\u30b9\u30bf\u30ea\u30f3\u30b0\u3092\u884c\u306a\u3044(Fingerprint:MOLPRINT2D,Metric:Tanimotosimirality)\u3001\u5404\u30af\u30e9\u30b9\u30bf\u30fc\u304b\u3089\u4ee3\u8868\u5316\u5408\u7269\u3092\u9078\u629e\u3057\u3001\u6700\u7d42\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u3068\u3057\u305f\u30022-5.\u6700\u7d42\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u30a2\u30c3\u30bb\u30a4\u6700\u7d42\u5019\u88dc\u5316\u5408\u7269\u306e\u4e2d\u304b\u3089\u7d0d\u671f\u30fb\u8cbb\u7528\u3092\u8003\u616e\u3057\u3001\u6211\u3005\u306e\u8cfc\u5165\u3067\u304d\u308b\u5316\u5408\u7269\u306b\u3064\u3044\u3066\u3001100\u00b5M\u3067\u306e%\u963b\u5bb3\u6e2c\u5b9a\u3092\u884c\u306a\u3046\u3053\u3068\u3068\u3057\u305f(\u30a2\u30c3\u30bb\u30a4\u306fBPSBioscience\u793e\u306b\u4f9d\u983c)\u3002\u5b9f\u9a13\u6761\u4ef6\u306f\u3001\u4ee5\u4e0b\u306e\u901a\u308a\u3067\u3042\u308b\u3002Buffer:50mMHEPES(pH=7.4),50mMNaCl,10mMCaCl2,2mMDYTT\u3001\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea:PAD4\u3001\u57fa\u8cea:BAEE(Na-Benzoyl-L-arginineethylesterhydrochloride)\u3001\u5b9f\u9a13\u6e29\u5ea6:37\u2103\u3001\u30a4\u30f3\u30ad\u30e5\u30d9\u30fc\u30b7\u30e7\u30f3\u6642\u9593:30min\u3001\u86cd\u5149\u6e2c\u5b9a:\u52b1\u8d77\u6ce2\u9577\/\u6e2c\u5b9a\u6ce2\u9577=413nm\/476nm3.\u7d50\u679c3-1.\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u30de\u30c3\u30d4\u30f3\u30b0\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u30de\u30c3\u30d4\u30f3\u30b0\u306e\u7d50\u679c\u30011WDA:28016\u500b,4X8C:22422\u500b,4X8G:27280\u500b\u306e\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u304c\u30de\u30c3\u30d4\u30f3\u30b0\u3055\u308c\u305f\u3002\u30de\u30c3\u30d4\u30f3\u30b0\u3055\u308c\u305f\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u306e\u4e2d\u304b\u3089\u3001\u300c\u30b5\u30d6\u30b5\u30a4\u30c8\u306e\u91cd\u306a\u308a\u5f97\u70b9\u304c25\u70b9\u4ee5\u4e0a\u300d\u3001\u304b\u3064\u300c\u30bf\u30f3\u30d1\u30af\u8cea\u8868\u9762\u4e0a\u306b\u57cb\u3082\u308c\u3066\u3044\u306a\u3044\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u300d\u3092\u9078\u5225\u3057\u305f\u3002\u305d\u306e\u7d50\u679c\u30011WDA:85\u500b\u30014X8C:56\u500b\u30014X8G:42\u500b\u306e\u30d5\u30e9\u30b0\u30e1\u30f3\u30c8\u304c\u5f97\u3089\u308c\u305f\u30023-2.\u30d0\u30fc\u30c1\u30e3\u30eb\u30b9\u30af\u30ea\u30fc\u30cb\u30f3\u30b03D\u30d5\u30a1\u30fc\u30de\u30b3\u30d5\u30a9\u30a2\u30d9\u30fc\u30b9\u30c9\u30d0\u30fc\u30c1\u30e3\u30eb\u30b9\u30af\u30ea\u30fc\u30cb\u30f3\u30b0\u306e\u7d50\u679c\u3001\u5408\u8a08\u3067717\u5316\u5408\u7269(1WDA:58\u5316\u5408\u7269\u30014X8C:487\u5316\u5408\u7269\u30014X8G:172\u5316\u5408\u7269)\u304c\u30d2\u30c3\u30c8\u3057\u305f\u3002\u3053\u308c\u3089\u306e\u5316\u5408\u7269\u306e\u30c9\u30c3\u30ad\u30f3\u30b0\u30b9\u30b3\u30a2\u3068\u5316\u5408\u7269\u306e\u56de\u8ee2\u53ef\u80fd\u7d50\u5408\u6570\u3067\u5224\u5225\u5206\u6790\u3092\u884c\u306a\u3044\u3001312\u5316\u5408\u7269(1WDA:29\u5316\u5408\u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